《植物生理学报》 2018, 54(12): 1813-1819

半夏茎尖脱毒培养及病毒检测

王宝霞¹, 齐永红², 肖雅尹¹, 崔丽艳¹, 王德富^1,*, 牛颜冰^1,*

¹山西农业大学生命科学学院, 山西太谷030801 ²山西省果业工作站, 太原030001

通信作者：王德富；E-mail: 王德富(wanderful226@aliyun.com)、牛颜 冰(niuyanbingbest@163.com)

摘　要：

以半夏(Pinellia ternata)茎尖为外植体, 研究不同生长调节物质浓度配比对半夏茎尖脱毒苗诱导效果的影响。在单因素试验基础上, 分别选取6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)三个最优诱导浓度设计L9(32)正交试验, 以确定茎尖愈伤组织诱导的最适培养基, 并利用分子生物学方法对脱毒苗进行病毒检测, 结果表明: 当6-BA浓度为1.5 mg·L-1, 2,4-D浓度为2.0 mg·L-1时, 愈伤组织诱导率最高。正交试验得出诱导愈伤的最佳培养基配方为MS+1.5 mg·L-1 6-BA+2.0 mg·L-1 2,4-D+7 g·L-1琼脂+30 g·L-1蔗糖, 并可一次性成苗。该培养基所诱导的脱毒苗经斑点酶联免疫吸附法(DOT-ELISA)和反转录PCR检测后, 烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)和大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus, SMV)脱毒率均达到100%。

关键词：半夏; 茎尖培养; 脱毒苗; 病毒检测

收稿：2018-09-04   修定：2018-10-09

资助：国家自然科学基金(31601612)。